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- 公 司： 內(nèi)蒙古奧普賽生物科技有限公司_胎牛血清
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- 細(xì)胞科普——細(xì)胞科普手冊(cè)
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- 發(fā)布時(shí)間：2023-05-11
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- 技術(shù)文章|細(xì)胞培養(yǎng)中常用的消毒方法
- 細(xì)胞培養(yǎng)最重要的就是保持無菌環(huán)境，實(shí)驗(yàn)室無菌、培養(yǎng)液無菌、耗材無菌，為了給細(xì)胞創(chuàng)造良好的無菌環(huán)境，讓細(xì)胞生長的更加安心無憂，小編整理了細(xì)胞培養(yǎng)過程中消毒滅菌的方法，供大家參考。 1房間消毒 1.1紫外線消毒 紫外線消毒是一種物理消毒方法，輻照能量低，能殺滅直接照射到的微生物，包括細(xì)菌繁殖體、芽孢、分支桿菌、病毒、真菌、立克次體和支原體等，凡是被上述微生物污染的表面、水和空氣均可采用紫外線消毒。 紫外線消毒的原理主要是用紫外光摧毀微生物的遺傳物質(zhì)核酸（DNA或RNA）使其不能分裂復(fù)制。除此之外，紫外線還可引起微生物其他結(jié)構(gòu)的破壞。微生物不能復(fù)制繁殖，就會(huì)自然死亡，從而達(dá)到消毒的效果。 紫外線消毒的適宜溫度范圍是20~40℃，溫度過高或過低均會(huì)影響消毒效果，同時(shí)紫外線的消毒效果與紫外燈的輻射強(qiáng)度和照射劑量呈正相關(guān)。輻射強(qiáng)度會(huì)隨距離增加而降低，照射劑量和照射時(shí)間呈正比。因此紫外燈與被照射物的距離和照射時(shí)間要適合。離地面2米的30W紫外燈可照射9平方米房間，每天照射2~3小時(shí)，期間可間隔30分鐘。燈管離地面2米以外要延長照射時(shí)間，2.5米照射效果較差。紫外燈照射工作臺(tái)的距離不應(yīng)超過1.5米，照射時(shí)間30分鐘為宜。 紫外線對(duì)微...
- 發(fā)布時(shí)間：2023-08-09
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- 技術(shù)文章|血清必須熱滅活嗎？
- 血清熱滅活是許多細(xì)胞培養(yǎng)者感興趣的話題，許多科研的小伙伴拿到一瓶全新的血清，總會(huì)猶豫血清究竟要不要進(jìn)行滅活處理、血清滅活要怎樣操作、在什么情況下要對(duì)血清進(jìn)行滅活等等，關(guān)于這些疑問，小編今天就為大家做一個(gè)詳細(xì)的解答。 一、什么是熱滅活？ 一般情況下，血清的熱滅活是在血清全部解凍后，置于56℃水浴中30分鐘進(jìn)行處理。如果為了更好的保留血清的營養(yǎng)成分，減少熱滅活對(duì)血清的損傷，可以將血清置于40℃水浴中20分鐘進(jìn)行熱滅活。 二、血清為什么要熱滅活？ 很多人認(rèn)為，血清熱滅活是為了消滅血清中的細(xì)菌、病毒等微生物，其實(shí)不然，一瓶合格的血清，在生產(chǎn)過程中，會(huì)嚴(yán)格把控血清中微生物的指標(biāo)。一般情況下，用戶買到的血清，都是無菌的，可以在解凍后直接進(jìn)行使用。 對(duì)血清進(jìn)行熱滅活處理，實(shí)際是為了使血清中的補(bǔ)體失活。補(bǔ)體是一種血清蛋白質(zhì)，存在于人和脊椎動(dòng)物血清及組織液中，不耐熱，活化后具有酶活性、可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)?？杀豢乖?抗體復(fù)合物或微生物所激活，導(dǎo)致病原微生物裂解或被吞噬。 三、胎牛血清需要滅活嗎？ 胎牛血清是來自未分娩的胎牛，經(jīng)心臟穿刺采血，后經(jīng)其他步驟制備而來的。這個(gè)階段的血清中，未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng)，不會(huì)真...
- 發(fā)布時(shí)間：2023-08-09
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- 不要沉淀，要美觀！——淺談血清沉淀
- 在細(xì)胞培養(yǎng)中，血清的品質(zhì)在一定程度上可以影響到細(xì)胞培養(yǎng)的成敗，如果血清中出現(xiàn)沉淀，不免會(huì)讓人擔(dān)心細(xì)胞會(huì)不會(huì)因?yàn)槌恋矶霈F(xiàn)問題。所以，關(guān)于血清沉淀，小編和大家分享以下幾點(diǎn)內(nèi)容。 一、血清沉淀物到底是什么？ 常見的血清沉淀有以下幾種： 纖維蛋白：纖維蛋白是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物，可以達(dá)到1~2mm，可以用肉眼觀察到。由于在生產(chǎn)過程中，血清采集、過濾和罐裝處理都是在低溫條件下快速完成的，血清中的纖維蛋白原處于溶解狀態(tài)，但在解凍后，血清中的纖維蛋白原往往會(huì)發(fā)生凝集，形成肉眼可見的沉淀。 磷酸鈣：常見的一種沉淀物，會(huì)造成血清渾濁，并且在37℃培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)增加，這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點(diǎn)，這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去可以活動(dòng)，因此通常會(huì)被誤認(rèn)為是微生物污染。 其他：膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)也是血清中出現(xiàn)沉淀的常見原因。 二、血清沉淀物對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有什么影響？ 血清出現(xiàn)沉淀是血清的正常特性，經(jīng)過我們的試驗(yàn)以及細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)表明，血清沉淀物不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)。 三、血清沉淀物是不是污染？ 血清沉淀物中，磷酸鈣往往會(huì)被誤認(rèn)為是微生物污染，特別是在37℃條件下培養(yǎng)后，...
- 發(fā)布時(shí)間：2023-08-09
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- 血清知識(shí)解讀，它來了！
- 上世紀(jì)50年代，科研人員已經(jīng)把血清添加到培養(yǎng)基中，并且取得了良好的培養(yǎng)效果，但是由于血清成分十分復(fù)雜，直至今天，血清中的所有成分仍未完全分析出來，并且血清成分及含量會(huì)隨動(dòng)物性別、年齡、生理?xiàng)l件的不同而發(fā)生改變?，F(xiàn)階段血清中已明確檢測(cè)出含有各種蛋白質(zhì)、多肽、生長因子、氨基酸、脂類、碳水化合物、無機(jī)物、維生素等，這些成分為細(xì)胞的正常生長提供了基本的營養(yǎng)物質(zhì)。 一、血清的分類 血清有多種類型，以牛血清為例，可以劃分為：胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清。 胎牛血清取自剖腹產(chǎn)的健康胎牛； 新生牛血清取自出生14h內(nèi)未進(jìn)食的新生牛； 小牛血清取自出生6月齡以內(nèi)的健康小牛（企業(yè)內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)）； 成牛血清取自健康的成牛（企業(yè)內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)）。 因胎牛未接觸外界，血清中抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害成分最少，故胎牛血清品質(zhì)最高。 二、血清的保存 長期保存建議存放于-15~-20℃環(huán)境中，若無法一次性將1瓶中的血清全部使用完畢，建議將血清分裝到一次性能夠用完的小瓶中，再進(jìn)行冷凍保存，避免出現(xiàn)反復(fù)凍融現(xiàn)象。 血清在放入冷凍環(huán)境前，建議瓶中預(yù)留一定的體積空間，避免血清凍結(jié)后體積增大，撐破包裝瓶，形成污染...
- 發(fā)布時(shí)間：2023-04-27
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- 細(xì)胞污染及防治措施
- 在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，流傳著一個(gè)詞語，叫做“談污色變”，污染對(duì)于每一位細(xì)胞培養(yǎng)者來說，都是災(zāi)難，它讓我們的努力都付諸東流，所以，要想細(xì)胞正常生長，實(shí)驗(yàn)圓滿完成，我們要先了解常見的細(xì)胞污染有哪些，并且針對(duì)這些污染要做出有效的防治措施。 一、細(xì)菌污染 細(xì)胞被細(xì)菌污染后，通常情況下，細(xì)胞培養(yǎng)液會(huì)變黃，變渾濁，鏡下觀察可見培養(yǎng)液中有大量圓球狀顆粒漂浮。常見的污染細(xì)菌為革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌，這兩種細(xì)菌對(duì)青霉素和鏈霉素較為敏感，所以細(xì)胞輕度污染時(shí)，建議用雙抗（青鏈霉素）清洗處理，一般情況下，一周左右細(xì)胞可恢復(fù)正常；重度污染時(shí)，建議消殺后丟棄。 二、真菌污染 污染細(xì)胞的真菌多為煙曲霉、黑曲霉、孢子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌，培養(yǎng)液不會(huì)出現(xiàn)顏色變化，但時(shí)間長了以后會(huì)有菌絲或者菌團(tuán)漂浮。顯微鏡下呈現(xiàn)樹枝狀或者串珠狀。細(xì)胞真菌污染后，較難根除，建議消殺后丟棄。 三、支原體污染 細(xì)胞被支原體污染后，細(xì)胞形態(tài)不會(huì)發(fā)生明顯變化，培養(yǎng)基也不會(huì)變渾濁，支原體可以和細(xì)胞共同生存，細(xì)胞不會(huì)死亡，但支原體會(huì)抑制細(xì)胞生長，影響細(xì)胞正常的代謝功能。需要特殊的檢測(cè)方法來判斷細(xì)胞是否被支原體污染，常用的方法有：DNA熒光染色法、支原體培養(yǎng)法、PCR法等。...
- 發(fā)布時(shí)間：2023-04-27